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等温滴定量热仪(ITC)通过非标记的、直接测定分子间相互作用过程中因非共价键重组所吸收和释放的能量,在一次实验中即可直接测定全套热力学参数,如亲和力、结合特异性、化学计量比、焓变、熵变以及吉布斯自由能变化等信息,为研究各类生物分子间相互作用提供全面而深入的视角。
等温滴定量热仪无需对样品进行任何标记、无需芯片固定和修饰,也无需再生步骤,无分子量大小和样品种类限制、是真正的无标记的溶液内互作技术,被业内认为分子间相互作用分析的金标准技术,可以用来交叉验证多种基于表面的生物传感器互作技术和荧光互作技术。数万篇科学论文的引用,是您与数万用户共同的选择。选择MicroCal ITC系列产品,显著提高研究数据的可靠性,并确保文献实验结果的可重现性。
PEAQ ITC (左),PEAQ-ITC Automated(右)
典型应用
药物设计-先导化合物优化
结合虚拟分子模拟和晶体结构数据,ITC技术可以帮助开发者设计和优化出既具有较高特异性(焓变贡献为主)、且具有较好的透膜性 (熵变贡献为主) 的药物分子 (熵焓平衡设计) 。
图1:HIV-蛋白酶抑制剂的研发过程
图2:第二代他汀类药物(Statins)
筛选和交互验证结合特异性
表观遗传学中的组蛋白marker研究,通过ITC实验,用具有不同甲基化修饰以及序列的组蛋白肽段marker (下图中由左向右依次为: H3K4me3, H3C4me3和H3G4)滴定蛋白TAF3 PHD结构域,从而确认特异性结合的组蛋白marker。
图3:由左向右依次为: H3K4me3, H3C4me3和H3G4
酶学动力学研究
Microcal ITC可以在无需对底物或产品进行任何修饰的情况下完成酶促动力学的研究,获取Km, kcat和Ki等数据。采用ITC和分光光度计进行酶促动力学(PNPP-PP1-γ)的研究的对比。使用两种不同技术获得的酶促动力学速率参数吻合非常好。
图4:不同技术获得的酶促动力学速率参数吻合
全自动的Microcal PEAQ-ITC Automated将Microcal PEAQ-ITC的性能与全自动化运行相结合,实现自动化与智能化运作。相比手动版,自动版将分析效率提升7倍。全自动化实现加样,清洗,样品转移,减少人员操作误差,减少新手培训和指导时间,提升数据质量和仪器使用效率。
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