当前位置:首页 > kaiyun安卓版官网下载 > 【知识库】为什么GPC需要光散射?
凝胶渗透色谱(GPC),又称尺寸排除色谱(SEC),是一种使用特殊的色谱柱、按照尺寸大小分离天然与合成高分子、生物高分子的色谱技术。
GPC 色谱的操作原理是利用分子的流体力学半径(Rh)或流体力学体积(Vh)进行分离,而非利用分子量的差异。分离过程在GPC色谱柱中进行,其柱填充物通常是聚苯乙烯凝胶、玻璃粉或硅胶等多孔物质。由于分子大小的差异,较大的分子无法进入凝胶的空隙,能更快的从色谱柱中被洗脱。
凝胶渗透色谱过程始于单相色谱泵,它推动流动相持续流过系统管路。系统内置脱气机则会去除管路以及溶剂中气体,以提高信号稳定性,降低噪音。进样方式可以是人工进样或自动进样。样品溶液随即被导入GPC色谱柱,开始尺寸分离过程。当样品从色谱柱被洗脱后,它将被一个或多个检测器进行检测,其结果最终被电脑的数据处理系统进行分析。
GPC色谱的分析程度取决于系统检测器的种类与数量。通过选定不同的检测器,按照不同的校准方法可以计算出分子量(MW)、分子量分布(MWD)、特性粘度(IV)、分子密度、水力半径(Rh)与回转半径(Rg)等参数。同时,也可能获得诸如构造、聚集度、支化等大分子结构以及共聚物组成等额外信息。
根据检测系统(检测器的数量及类型)的不同,常见有以下两种实验方法:
传统校准法
三检测联用法(包含了光散射检测器)
其中,传统检测法运用浓度检测器和已校准的GPC柱,能够测量相对分子量和聚合度多分散性。而光散射检测器和浓度检测器联用,能够提供绝对分子量、分子尺寸大小、特性粘度以及分子构成、聚集与支化的信息。